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原代細胞培養的過(guò)程中經(jīng)常出現這樣的情況，是有些細胞處于終末分化狀態(tài)，不會(huì )再分裂，時(shí)間長(cháng)了就會(huì )空泡化而死亡。

傳代細胞出現這種狀況比較少見(jiàn)，出現的原因一般都是因為細胞傳代次數過(guò)多，老化嚴重。

2）PH值

培養液的PH值與細胞正常所需PH值差別太大。

3）胰酶消化

胰酶消化時(shí)間過(guò)長(cháng)，會(huì )導致細胞狀態(tài)受損，有時(shí)也會(huì )出現這種情況。除此之外，如果消化細胞吹打時(shí)力度過(guò)大，產(chǎn)生太多氣泡，長(cháng)期存在也會(huì )出現這種現象。

4）自噬

5）細胞代謝

在細胞培養過(guò)程中，由于血清濃度不夠、藥物作用、外界刺激等情況下導致細胞代謝出現問(wèn)題，內質(zhì)網(wǎng)應激狀況下會(huì )出現細胞空泡化的情況。

6）污染

衣原體感染：一旦一些細胞出現空泡化，繼續培養，空泡范圍會(huì )擴大，即使傳代后也如此，出現這種情況，細胞基本無(wú)法挽救。后來(lái)檢測發(fā)現，此種細胞存在衣原體的感染。

支原體污染：支原體污染在不嚴重的時(shí)候細胞是沒(méi)有什么明顯癥狀的，而且也無(wú)法通過(guò)光學(xué)顯微鏡觀(guān)察到，只有在嚴重的時(shí)候會(huì )導致細胞狀態(tài)變差，出現細胞空泡化的現象，細胞膜上也會(huì )出現小黑點(diǎn)附著(zhù)。

7）藥物誘導

一些特定的誘導劑處理，是細胞質(zhì)空泡化的原因，一般是需要觀(guān)察細胞變化而對細胞進(jìn)行的特殊處理。

2）如果是培養液PH的問(wèn)題，可以通過(guò)更換培養液調整到合適的PH值，再進(jìn)行培養。

3）在傳代時(shí)，要選用合適濃度的胰酶和選取適當的消化時(shí)間進(jìn)行消化，在操作時(shí)避免吹打太過(guò)用力出現太多氣泡。

4）要保證細胞培養所需的營(yíng)養充足，可以通過(guò)增加血清濃度和在培養基中加入谷氨酰氨解決。

5）盡量使用質(zhì)量好和渠道正規的胎牛血清，因為這樣的血清營(yíng)養豐富且外源刺激因子少，可以有效的避免出現這類(lèi)問(wèn)題。

6）在細胞培養時(shí)要嚴格進(jìn)行無(wú)菌操作，操作時(shí)要規范，避免污染?？梢酝ㄟ^(guò)試劑盒檢測細胞是否污染，對于已經(jīng)污染的細胞滅菌后直接處理，避免污染其他細胞。