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首先我們需要區分原代細胞和細胞系的概念：

原代細胞(primary cell)是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細胞并在體外進(jìn)行模擬機體培養的細胞。

細胞系(cell line)是原代細胞經(jīng)首次傳代成功后即為細胞系。其中能夠連續傳代的細胞叫做連續細胞系或無(wú)限細胞系，不能連續培養的稱(chēng)為有限細胞系。人類(lèi)腫瘤細胞，在體外培養半年以上，生長(cháng)穩定，并連續傳代的即可稱(chēng)為連續性株或系。

原代細胞培養之組織取材

原代細胞最接近和最能反映體內生長(cháng)特性，適宜用于藥物敏感性試驗、細胞分化等實(shí)驗研究。

原代細胞的培養方法

組織塊培養法：

將剪成的小組織團塊接種于培養瓶（或皿）中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。

消化培養法：

該方法是源于消化分散法，將妨礙細胞生長(cháng)的細胞間質(zhì)（包括基質(zhì)、纖維等）去除，使細胞分散形成細胞懸液，然后分瓶培養。

懸浮細胞培養法：

對于懸浮生長(cháng)的細胞，如淋巴細胞、骨髓細胞、和免疫細胞等無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。

器官培養：

從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養，其特性仍保持原有器官細胞的組織結構和聯(lián)系、并能存活。

注意事項：

注意事項

1. 培養液和培養物的比例：一定濃度的培養物僅能支持一定數量的細胞生長(cháng)，不能盲目增加每單位體積的細胞濃度。

2. pH：初培養pH應為7.4，培養過(guò)程中應不低于7.0。

3. 培養瓶?jì)鹊目臻g：一般培養瓶?jì)扰囵B液與液面上的空間體積之比為1:10。

細胞系培養

細胞系常見(jiàn)生長(cháng)方式分為貼壁細胞和懸浮細胞

懸浮細胞傳代步驟

直接傳代法

1、待懸浮細胞長(cháng)滿(mǎn)至80%～90%（細胞懸液變黃），即可傳代；

2、用吸管吸棄細胞懸液 1 /2～1 / 3；

3、加入適量的新鮮培養基，繼續培養。

離心傳代法（在發(fā)現有細胞碎片的情況下）

1、將細胞懸液轉移到離心管內；

2、150 g 離心 5 min，棄去上層清液；

3、使用新鮮的培養基重懸細胞；吸管吸取適量細胞懸液，裝入新的培養瓶，      再加入適量的新鮮培養基，繼續培養。

貼壁細胞傳代步驟

清洗—消化—終止—標記