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衰老or老化

細胞衰老是指穩定細胞周期停滯的狀態(tài)，在這種狀態(tài)下增殖細胞會(huì )對促生長(cháng)刺激產(chǎn)生耐受，通常由 DNA 損傷所引起。Leonard Hayflick 首先描述了細胞衰老，他觀(guān)察到人類(lèi)胎兒成纖維細胞最終會(huì )停止分裂，但在長(cháng)時(shí)間培養后仍然具有活力和代謝活性?，F在普遍認為，除了具有干細胞樣特性的細胞類(lèi)型外，只有轉化的惡性細胞會(huì )無(wú)限復制，而非轉化細胞則不會(huì )。除了在體外受控條件下發(fā)育的胚胎干細胞或誘導多能干細胞，此類(lèi)細胞還包括內源性生殖干細胞和成體干細胞。衰老細胞與靜息細胞和終末分化細胞均不同，其中靜息細胞能夠重新進(jìn)入細胞周期。

衰老細胞的特征是形態(tài)學(xué)和代謝變化、染色質(zhì)重構、基因表達改變以及出現一種稱(chēng)為衰老相關(guān)分泌表型 (SASP) 的促炎癥表型。衰老的生物學(xué)作用復雜，衰老細胞的保護作用和有害作用均已有描述，主要取決于生理環(huán)境。例如，盡管衰老可能作為避免受損細胞惡性轉化的機制進(jìn)化而來(lái)，但衰老的發(fā)生可能會(huì )導致許多年齡相關(guān)病變，包括癌癥、組織退化和炎癥性疾病。

老化和細胞衰老這兩個(gè)術(shù)語(yǔ)不能互換使用。老化是隨時(shí)間推移的進(jìn)行性衰退，而衰老在整個(gè)生命周期中都可發(fā)生，包括胚胎發(fā)生期間。衰老細胞的數量隨著(zhù)年齡增大而增加，但衰老還在發(fā)育以及傷口愈合中發(fā)揮重要作用。

老化是什么

老化是生命發(fā)展的必然，任何細胞從誕生之時(shí)起，老化過(guò)程就開(kāi)始了。老化的細胞結構蛋白、酶蛋白和受體蛋白合成減少，攝取營(yíng)養和修復染色體損傷的能力均下降，表現為細胞和胞核變形，線(xiàn)粒體、高爾基體扭曲或呈囊泡狀，胞質(zhì)色素沉著(zhù)，細胞體積縮小，由此導致器官重量減輕，間質(zhì)增生硬化，功能代謝降低，儲備功能不足。

肉眼顯微鏡下觀(guān)察細胞主要鏡下特征：

1、細胞內部會(huì )出現空泡（可能是凋亡小體），也可能會(huì )出現黑點(diǎn)，大多沿細胞周邊排布，內部中間也可能會(huì )顯現一些，但相對周邊為少。

2、老化以后的細胞會(huì )出現形態(tài)的改變，立體感會(huì )慢慢消失，開(kāi)始成扁平狀，細胞與細胞之間的間隔減小或混在一起，細胞不再是梭形，而會(huì )成為各種不規則形狀。

3、細胞折光性變差，鏡下可見(jiàn)細胞“變薄”，做轉染實(shí)驗時(shí)，細胞死亡率會(huì )較高。但培養液不會(huì )發(fā)生迅速變黃的現象，仍清亮。

4、細胞的貼壁性減弱，開(kāi)始有細胞漂浮于培養液中。

5、老化的細胞，表面分泌物會(huì )增多，細胞表面的純凈度越來(lái)越低。

6、分裂的細胞數量明顯地減少同時(shí)細胞的增殖速度也會(huì )大大下降。

7、細胞開(kāi)始長(cháng)角分化。

老化的原因

1、氧化應激：由內在或外在因素引起的氧化壓力會(huì )加速細胞老化。

2、端?？s短：端粒是染色體末端的保護結構，其縮短會(huì )導致細胞分裂次數有限，從而引發(fā)細胞老化。

3、細胞自噬功能降低：細胞自噬是細胞內部清理和修復機制的一部分，功能降低會(huì )導致細胞老化。

4、營(yíng)養不足：培養液中的營(yíng)養成分不足也會(huì )導致細胞老化。

5、傳代次數過(guò)多：在體外培養過(guò)程中，細胞傳代次數過(guò)多或時(shí)間過(guò)長(cháng)也會(huì )引起細胞老化。

如何預防細胞老化

1、不要等細胞長(cháng)得太滿(mǎn)才傳代。細胞太密會(huì )導致細胞狀態(tài)下降，產(chǎn)生細胞接觸性抑制。一般密度到80-90%左右就可以傳代了。

2、細胞不要消化過(guò)度。采用胰蛋白酶消化細胞，會(huì )造成細胞表面一定程度的細胞損傷。一定要注意選用的胰酶品牌，使用的胰酶量，絕大多數細胞使用0.25胰酶含edta這款消化液，t25瓶1ml，培養箱消化1min即可拿出來(lái)在顯微鏡下看細胞脫落情況。

3、最重要的是使用優(yōu)質(zhì)的血清和培養基：干細胞對培養基中的內毒素非常敏感。除了要留意基礎培養基的內毒素外，也要留意血清的內毒素。如果血清中內毒素≥3EU/ml時(shí)，干細胞很容易老化或死亡，導致細胞“亞健康”狀態(tài)，導致實(shí)驗受到影響。很多使用者，在血清在試用前，就會(huì )通過(guò)提早審核該批次《檢測報告》，以決定是否入圍進(jìn)行試用。

4、在開(kāi)始養細胞并傳代時(shí)，也要特別注意凍存細胞，以保持細胞有種子庫存在，可以有效避免細胞損傷