BC-CL05 |
BC Trans-Universal |
規(guī)格 | 1mL/1.5mL |
產品編號 | 銷售價 | 促銷價 | 庫存 | 數(shù)量 | 單位 | 加入購物車 |
---|
【貨號】 BC-CL05
【規(guī)格】 1ml/1.5ml
【保存】 ?2-8℃,12個月
【類型】 ?陽離子聚合物
【產品介紹】
BC Trans-Universal是一款高性能、高品質的通用型基因轉染試劑,既可用于轉染質粒DNA,又具有較強的RNA轉染能力。BC Trans-Universal具有不受血清影響、毒性低、穩(wěn)定性好、轉染簡單易行、重復性好等優(yōu)點。
【應用范圍】
BC Trans-Universal轉染試劑可適用于眾多較難轉染細胞株的DNA/siRNA轉染、瞬時轉染及穩(wěn)定轉染。適用于多種貼壁細胞,特別適用于各種較難轉細胞如L929、NIH3T3、MCF-7和A549等,均可得到較高的轉染效率,且重復性好。
【?質粒DNA的轉染步驟】
1. 質粒DNA的轉染:
以24孔板為例,請參考表1的轉染規(guī)模調整,步驟如下:
(1)?細胞接種: 每孔接種0.5~1.0×105個細胞,細胞培養(yǎng)12~24小時,使轉染時細胞密度達到60~70%融合度
(2)?質粒稀釋: 將0.4μg質粒稀釋于Opti-MEM培養(yǎng)基中,終體積10μL
(3)?復合物制備: 按比例取適量BC Trans-Universal稀釋于Opti-MEM培養(yǎng)基中, 終體積10μL,室溫孵育5分鐘后與質粒稀釋液混勻
(4)室溫靜置20分鐘
(5)?每孔20μL 復合物加入細胞培養(yǎng)板中,混勻,37℃培養(yǎng)18~48小時后檢測基因表達,無需更換培養(yǎng)基
2.?siRNA的轉染
轉染步驟與DNA相同,請參考表1的轉染規(guī)模進行調整,所有數(shù)量和體積均是按孔計算。轉染高密度細胞可獲得高轉染效率、高表達水平和低細胞毒性。
【質粒DNA和siRNA的轉染優(yōu)化】
可通過改變細胞密度、 DNA/siRNA濃度以及BC Trans-Universal濃度對轉染進行優(yōu)化。保證細胞融合度在60%以上,BC Trans-Universal (μL): DNA (μg)可以在1:1和5:1之間調整;BC Trans-Universal (μL): siRNA(pmol)可以在0.02:1和0.15:1之間調整。
?
表1. ?不同培養(yǎng)板所需轉染試劑和DNA/siRNA的用量