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① 消化過(guò)度：

在消化過(guò)程中縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度，鏡下觀(guān)察細胞剝離的狀態(tài)，及時(shí)終止消化。

② 支原體污染：  

取培養24小時(shí)的培養基，檢測支原體。清潔培養箱。如發(fā)現支原體污染，丟棄培養物。

③ 培養基pH值過(guò)堿（NaHCO₃分解）：

可以使用無(wú)菌醋酸溶液調整pH值或充入無(wú)菌CO₂來(lái)調整培養液的PH值。

④ 細胞老化：

建議復蘇新的保種細胞，一般細胞老化的細胞會(huì )持續出現較嚴重的形態(tài)變化或者凋亡的情況。

⑥ 接種細胞起始濃度太低或太高 。

建議調節最佳接種細胞濃度。當細胞濃度太高則貼壁位置不夠，細胞濃度太低則勢單力薄，培養基的輕微晃動(dòng)就可能使其脫落。

① 為什么培養基顏色會(huì )有不同深淺：

不同品類(lèi)的培養基中的酚紅指示劑添加含量也是不相同的，所以客戶(hù)會(huì )看到不同種類(lèi)的培養基會(huì )有不同顏色；一般顏色的深淺為DMEM＞MEM＞DMEM/F12＞RPMI1640＞F12。

② 培養基在冰箱中為什么顏色會(huì )變深：

因為在空氣中CO2濃度低，而培養基內CO2則會(huì )逐漸溢出，HCO3-減少，就會(huì )造成培養基偏堿，液體顏色變深。

③ 培養基中含有谷氨酰胺的保存條件：

谷氨酰胺對溫度比較敏感，溫度越高的話(huà)降解速度越快。并且谷氨酰胺在溶液中不穩定，一般應置于-20℃冰箱中保存。加有谷氨酰胺的液體培養基應存放在2℃–8℃溫度中保存。

④ DPBS和PBS有什么區別：

這兩者都屬于磷酸鹽緩沖液，成分上只有一點(diǎn)點(diǎn)磷酸鹽的含量差異，均有等滲和調節pH的功能，大多數對于細胞的使用上可以通用。

⑤ HBSS和PBS/DPBS有什么區別：

HBSS緩沖液中鹽成分較PBS和DPBS更復雜，且含有葡萄糖，可為細胞提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養，而PBS/DPBS不能提供營(yíng)養。