亚洲人成在线播放网站,成人在线免费观看视频,久久无码精品免费一区二区三区,热久久精品一区二区三区

A549細胞來(lái)源

A549細胞又稱(chēng)為肺癌人類(lèi)肺泡基底上皮細胞，最早是在1972年由D.J.Giard等人通過(guò)一位58歲的白人男性的外植體腫瘤，轉移并培養肺腫瘤組織而得到的。

       在自然界中，這些細胞是鱗狀的，它們可以通過(guò)肺泡擴散傳播一些物質(zhì)，如水和電解質(zhì)。如果將A549細胞體外培養，它們會(huì )成長(cháng)為單層細胞，附著(zhù)或緊貼在培養瓶上。人肺泡上皮細胞株A549可以固定或懸掛在體外的溶液。

A549細胞培養體系

  a

A549細胞特點(diǎn)

     部分細胞傳代后細胞內出現黑色小點(diǎn)，細胞間隙內出現少量顆粒物或者培養基中浮游著(zhù)少量死細胞等均為正?，F象，對細胞的增殖及試驗無(wú)影響。

細胞消化或者復蘇操作不當容易導致細胞死亡裂解產(chǎn)生大量碎片及顆粒，進(jìn)而影響活細胞狀態(tài)，注意消化或復蘇過(guò)程盡量輕柔，嚴格控制消化時(shí)間和復蘇操作規范，傳代或復蘇24h后建議觀(guān)察細胞，建議換液一次去除死亡細胞；

A549細胞常見(jiàn)問(wèn)題處理

Q: 培養過(guò)程中出前黑點(diǎn)問(wèn)題如何處理？

A: 細胞內的黑色顆粒是細胞外分泌泡及細胞器折光，這個(gè)屬于細胞自身特性，無(wú)法清除也無(wú)法改變，大部分細胞都會(huì )有這種現象，只是不同細胞顆粒多少有區別，細胞培養體系不適應、營(yíng)養缺乏、滲透壓異常等均可能導致細胞內顆粒增加，建議使用合適的培養條件。

細胞外的黑色顆粒大部分是細胞碎片和細胞代謝產(chǎn)物，可以先吸走培養基后用PBS潤洗清除，再加新的培養基繼續培養。潤洗不能清除的可以換液清洗后等細胞密度70-80%左右消化處理細胞，消化完成后加完全培養基終止消化，混勻細胞，收集細胞懸液900-1000rpm(約150g)離心3min，棄上清。再加5ml PBS重懸細胞，再離心后，用完全培養基重懸接種到新的培養皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果平時(shí)碎片比較少，傳代時(shí)可以省略PBS重懸的步驟；如果碎片很多，建議PBS多洗幾次。

Q: A549細胞最佳消化時(shí)間建議多久

A： 每個(gè)客戶(hù)用的胰酶活力及消化步驟、試劑都是不一樣的，不能完全規定消化時(shí)間，以實(shí)際消化效果和客戶(hù)經(jīng)驗為準。

Q:  A549 細胞倍增時(shí)間多久？

A: 該細胞倍增時(shí)間較短，生長(cháng)速度快，注意控制傳代密度，建議1:3-1:4。