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英文名稱(chēng)：B16-F10

中文名稱(chēng)：小鼠皮膚黑色素瘤細胞

種   屬：鼠源

組織來(lái)源：器官；皮膚；品系：C57BL/6J；疾??；黑色素瘤

生長(cháng)特性：貼壁生長(cháng)

細胞形態(tài)：梭形細胞樣；上皮細胞樣

傳代比例：1:2 ~ 1:4

換液頻率：2~3次/周

倍增時(shí)間：48-72h

培養體系：DMEM（高糖）+10%FBS+1%P/S

培養條件：5%CO2；37 ℃

凍存條件：Biochannel細胞凍存液，程序降溫，液氮長(cháng)期保存。

【細胞培養特點(diǎn)】

1. 該細胞在DMEM(含1.5g/L NaHCO3)培養基中生長(cháng)良好，大部分品牌的DMEM含有較高濃度的NaHCO3（3.7g/L），若使用DMEM（3.7g/LNaHCO3）培養基培養細胞時(shí)需要提高CO2濃度（7%-10%）。

2. 該細胞我們推薦的基礎培養基是DMEM（高糖）培養基；

3. 據反映DMEM養B16-F10，細胞會(huì )很黑，分泌黑素量比較多；而1640養比較白，黑素分泌量比較少。（依據實(shí)驗需求可嘗試更換培養體系，更換時(shí)建議留種）；

4.更換為DMEM培養液培養時(shí)，請保證血清和培養液質(zhì)量，不然營(yíng)養問(wèn)題會(huì )導致細胞不長(cháng)、生長(cháng)緩慢以及黑色素大量分泌。

【常見(jiàn)問(wèn)題】

Q: 收貨時(shí)細胞出現偽足，或是碎片較多怎么辦？

A：受到運輸影響，懸浮細胞會(huì )短暫性出現形態(tài)改變的現象，如偽足等。通過(guò)傳代培養，1周左右可以恢復正常。一些細胞在運輸途中死亡而產(chǎn)生碎片，通過(guò)傳代離心可以去除（見(jiàn)上文傳代篇）。

Q：培養過(guò)程中細胞發(fā)生貼壁怎么辦？

A: 少量細胞貼壁屬于正常情況，將細胞懸液轉移至新瓶中即可。當貼壁細胞的比例高于20%，說(shuō)明細胞生長(cháng)環(huán)境有異常，需排查培養箱設置、培養基成分，以及培養器皿是否異常。

Q：培養過(guò)程中細胞發(fā)生聚團怎么辦？

A：少量細胞聚團，呈葡萄串狀，屬于正?，F象，特別是細胞密度較低時(shí)，易出現這種情況。更換血清品牌或增大血清比例（不超過(guò)20%）有助于解決聚團問(wèn)題。不建議將聚團的細胞吹散，等待密度高時(shí)，會(huì )自己分散開(kāi)。

Q：培養基里一定要加β-巰基乙醇嗎？

A：β-巰基乙醇是一種常用的培養補充劑，有抗氧化的作用，可減少氧化應激對THP-1細胞的影響。當細胞密度過(guò)大但需要維持時(shí)，可適當增加巰基乙醇的比例（不超過(guò)標準量的1.5倍）。

Q：鏡下觀(guān)察時(shí)，難以聚焦或估算密度怎么辦？

A：懸浮細胞會(huì )隨著(zhù)液體流動(dòng)，不容易聚焦，靜置5-10min使細胞沉底，之后在輕輕放上顯微鏡觀(guān)察，將有助于聚焦和估算細胞密度。

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貨期短，貨期1-2周；

6、凍存細胞庫管理

避免源頭污染，低溫集中供液，有效保障細胞復蘇后的存活率；

7、專(zhuān)業(yè)服務(wù)

完善的技術(shù)支持服務(wù)和售后保障；

8、四級細胞庫管理

減少交叉感染，安全性更高，快捷拿取，提高細胞復蘇存活率。